在进行细胞培养、微生物无菌检测时
被细菌、真菌、酵母菌污染
真是一个十分常见的现象
各种菌种污染五花八门
NO.1 细菌污染
细菌污染是细胞培养过程中比较常见的污染之一,其污染源主要是实验室人员、环境、服装、实验用器具等,主要种类有:革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌,前者如枯草杆菌、葡萄球菌等,后者如大肠杆菌、假单胞菌等。
肉眼观察
受细菌污染后,培养液会变浑浊,表面出现薄膜、泡沫或斑块,PH值下降,也有少部分肉眼观察几乎没有变化,只能在镜下发现菌体才知污染情况。
10倍显微镜下观察
被污染的细胞在显微镜下可以观察到细胞胞浆出现大量颗粒,细胞变圆或者崩溃,从壁上脱落死亡。一般细菌污染进程很快,大约污染一两天后肉眼就能显著观察到变化。
NO.2 真菌污染
真菌污染是细胞培养过程中最常见的另一种污染,尤其在梅雨季节,霉菌污染尤为严重。另外,由于真菌可以通过孢子繁殖,因此一旦污染很容易发生扩散。
肉眼观察
霉菌污染的细胞培养液短期内一般不会浑浊,可在培养液表面形成白色或黄色漂浮物(斑点状),真菌会与细胞抢夺营养,还会释放次级代谢物毒害细胞,造成细胞活力变差,生长速度变慢,甚至死亡。
10倍显微镜下观察